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DH5α-T1R 感受态细胞	DL1005S	20×100ul
	DL1005M	100×100ul

基因型

F- φ80 lacZ∆M15 ∆(lacZYA-argF)U169 recA1 endA1 hsdR17(rk-, mk+) phoA supE44λ-thi-1 gyrA96 relA1 tonA

产品说明

DH5α-T1R菌株，来源于DH5α菌株。在DH5α大肠杆菌基因组中引入tonA，赋予其抗噬菌体T1,T5的能力，即为DH5α-T1R。DH5α-T1R菌株广泛应用于各种DNA的克隆和文库构建试验，具有比普通DH5α更好的安全性。DH5α-T1R菌株缺失核酸内切酶 (endA1)和重组酶(recA1)，提高了质粒DNA的产量和质量； lacZΔM15的存在使DH5α-T1R可用于蓝、白斑筛选；DH5α-T1R细胞数的倍增时间比普通DH5α长，37度、200rpm生长时约需40min(+/-5)，DH5α-T1R菌落生长或液体摇菌比普通DH5α需要更长时间。唯地生物的DH5α-T1R感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19质粒（2686bp，Amp^R）检测转化效率>5×10⁸ cfu/μg DNA。

操作方法

1. DH5α-T1R感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA，并用手拨打EP管底混匀，冰中静置25分钟。

2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。

3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏70分钟。

4. 5000 rpm离心1分钟收集菌体，留取50 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的LB培养基上。

5. 将平板倒置放于37℃培养箱至少17小时。

注意事项

1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化。插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。

2. 混入目的DNA时应轻柔操作，转化高浓度质粒或连接产物可相应减少用于涂板的菌量。

3. 若要获得大量，高纯度质粒，建议在TB培养基（唯地CAT#：CM1018L）中摇菌培养（以标准质粒PUC19为例：在TB营养液中过夜培养的菌体浓度和质粒产量为LB的3-4倍，SOC的2倍）