SGR/–Trp/–Ura/+X-gal with Agar - 上海唯地生物技术有限公司

显色相关培养基与试剂

培养基系列

SGR/–Trp/–Ura/+X-gal with Agar

产品说明

X-gal即X-β-gal是β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)的底物，水解后呈蓝色，英文名：5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D- Galactoside，中文名：5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-吡喃半乳糖苷，常用于大肠杆菌的蓝白斑筛选，酵母单/双杂的X–Gal显色等试验。葡萄糖抑制β-半乳糖苷酶的表达，不能作为 lacZ（β-半乳糖苷酶）显色反应的碳源，SGR/–Trp/–Ura/+X-gal with Agar为添加了显色底物X-β-gal的以半乳糖、棉子糖为碳源的固体培养基，可用于酵母单/双杂交系统中LacZ 报告基因的检测；当有互作发生，lacz 报告基因表达，生成β-半乳糖苷酶，将 x-gal 切割成半乳糖和深蓝色的底物5-溴-4 氯靛蓝，促使菌落变成蓝色。例如：SGR/–Trp/–Ura/+X-gal可用于EGY48/pJG4-5/pLacZi酵母单杂系统的的显色试验；添加了Ura的SGR/–Trp/–Ura/+X-gal可用于Y187/pGBKT7系统的转录因子自激活活性分析试验。

产品规格

货号	规格	目录价
YEM6020S-001	0.5L	280
YEM6020S-01	2.5L	850

产品组分与配方

产品组分	货号	YEM6020S-001	YEM6020S-01	100 ml 含量	保存条件
SC/–Trp/–Ura with Agar	YM4234S	0.5L	2.5L	2.74g	室温干燥
20%半乳糖溶液（过滤除菌）	C1020	50 ml	250 ml	10 ml	室温干燥
20%棉子糖溶液（过滤除菌）	C1030	25ml	125ml	5ml	室温干燥
10X BU Salts	YC8070	50ml	250ml	10ml	4℃
X-gal 溶液（20 mg/ml，过滤除菌）	YC8012	1ml X 2	5ml X 2	0.4ml	-20℃

使用方法

一，SGR/–Trp/–Ura/+X-gal with Agar显色板倒平板：

SC/–Trp/–Ura with Agar固体培养基按2.74g/100ml比例加水，121℃-15min灭菌，温度降到60度以下依次加入适量的半乳糖、棉子糖溶液，10X BU Salts，X-gal 溶液，摇匀倒平板。平板凝固后可放入4度避光保存（最多可保存两个月，半乳糖、棉子糖、10X BU Salts加入量较大，可在添加前放55度预热，以防止倒板过程中凝固）。

二，SGR/–Trp/–Ura/+X-gal with Agar平板使用方法

步骤	EGY48/pJG4-5/pLacZi	Y187/pGBKT7
1，将构建好的质粒转入酵母感受态细胞，涂筛选平板	SD/–Trp/–Ura with Agar	SD/–Trp with Agar
2，筛选平板长出的菌落转移到显色平板，30度生长72h	SGR/–Trp/–Ura/+X-gal with Agar	SGR/–Trp/+X-gal with Agar

注意：Y187/pGBKT7系统用SGR/-Trp/-Ura/+X-gal显色平板做转录因子自激活分析试验时，需添加终浓度20mg/L的尿嘧啶（YC8061）

不同酵母LacZ报告基因备注

含LacZ报告基因，可以用X-Gal显色的酵母：AH109，Y187，Y2HGold，Y190，EGY48(含LACZi质粒)，NMY51等。

注意事项

1. 不开封的各组分可保存1年，开封后若发现染菌，停止使用。

2. 若用SGR/–Trp/–Ura/+X-gal with Agar显色平板做Y187/PGBKT7系统的转录因子自激活活性分析试验，需添加终浓度20mg/L的尿嘧啶（唯地货号：YC8061）