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毕赤培养基与试剂

BMGY Broth 粉剂培养基
BMGY Broth 粉剂培养基

产品说明

BMGY:Buffered Glycerol-complex Medium(缓冲型复合甘油生长培养基)毕赤酵母表达系统中标准、通用、首选的富营养缓冲型生长培养基。以甘油为唯一碳源,含磷酸钾缓冲体系、酵母提取物、蛋白胨、YNB、生物素,用于毕赤酵母诱导前高密度菌体扩增,是毕赤酵母蛋白表达体系中优先配套 BMMY 诱导的标准生长培养基(同时适配MM、MMH、BMM、BMMH培养基)。

     核心特性:

     - 含100 mM 磷酸钾缓冲体系,稳定 pH 6.0,培养过程无明显 pH 漂移,实验重复性高;

     - 含酵母提取物,蛋白胨富营养体系,支持菌体快速增殖,可获得最高菌体密度,提高蛋白产量;

     - 甘油为专一生长碳源,不会激活 AOX1 启动子,用于种子液扩增,可消除背景;

     - 体系内源含有充足组氨酸,可同时适配His⁺野生型菌株、his4⁻缺陷菌株。

产品内容


包装名称
货号 包装含量 包装数量 目录价 保存条件/时间
BMGY Broth 粉剂培养基 PIM1070L-04 217g 1瓶 480 室温干燥/24个月
500 × B (0.02% Biotin) 20ml -20℃/12个月
50%甘油(过滤除菌) 100ml 室温干燥/24个月
10 × 磷酸钾缓冲液1M,PH6.0   500 ml 4℃/24个月

附言:YNB中含有大量易分解B族维生素,需要避光保存,液体的YNB在4℃可保存3个月,在-20℃最多保存12个月,粉末状YNB最长保存3年。1×YNB液体可过滤除菌,也可115℃-20min高压灭菌(虽然在高温高压下部分B族维生素会降解10-15%,但是仍有大量有活性的有效成分,不影响使用);10×YNB母液只能过滤除菌,不可高压灭菌。毕赤酵母不能合成生物素,必须额外添加。


产品组分与配方



产品组分
CAS号/来源 BMGY Broth配方g、mL/L
Peptone
BD Difco 20g

Yeast Extract

Oxoid 10g
YNB (含硫酸铵,无氨基酸) WD(YM1214) 13.4g
Biotin (生物素) CAS:58-85-5 0.4mg
Glycerol(甘油) CAS:56-81-5 10mL

PH值( 25°C) 6.0±0.1


使用方法


     本产品为预混BMGY Broth粉剂培养基。取BMGY Broth 43.4 g,加蒸馏水800ml溶解后,定容到878ml,115℃-20 min高压灭菌,灭菌后加入已经过滤除菌的50%甘油20ml,生物素母液(500 × B)2ml,10 × 磷酸钾缓冲液1M,PH6.0  100 ml,混匀后待温度降到30度左右使用。


不同蛋白适配的诱导前菌体扩增培养基


   蛋白类型  
   推荐培养基
   货号
   适配菌株
   普通分泌型蛋白(高产常规表达)
   BMGY
   CAT#:PIM1070L
   所有毕赤酵母菌株
   易降解、高敏感分泌蛋白
   BMG / BMGH
   CAT#:PIM1050L
   His⁺用BMG;his4⁻用BMGH
   所有胞内重组蛋白
   MGY / MGYH
   CAT#:PIM1030L
   His⁺用MGY;his4⁻用MGYH
   质谱/定量组学/同位素标记实验蛋白
   MGY / MGYH
   CAT#:PIM1030L
   His⁺用MGY;his4⁻用MGYH
   Mut⁺/Mutˢ表型鉴定配套培养
   MGY / MGYH
   CAT#:PIM1030L
   His⁺用MGY;his4⁻用MGYH
   pH敏感型蛋白(胞内/分泌)
   BMG / BMGH
   CAT#:PIM1050L
   His⁺用BMG;his4⁻用BMGH


注意事项


1. BMGY粉剂培养基需先补水,115℃-20 min高压灭菌后使用;若发现有严重吸潮现象,停止使用。

2. BMGY为生长专用培养基,仅用于菌体扩增阶段,无甲醇诱导功能,不可用于蛋白表达诱导。

3. 切换诱导培养基时,必须彻底去除残留甘油,甘油会抑制AOX1启动子,导致后续蛋白诱导表达失败。

4. 若配制少于0.5L,按每100ml加4.34g预混培养基的比例加入即可,剩余培养基可封口后放干燥处保存。

5. 生物素对紫外/强光敏感,需要避光保存,液体的生物素最多保存12个月,粉末状生物素最长保存3年。

产品内容


包装名称
货号 包装含量 包装数量 目录价 保存条件/时间
BMGY Broth 粉剂培养基 PIM1070L-04 217g 1瓶 480 室温干燥/24个月
500 × B (0.02% Biotin) 20ml -20℃/12个月
50%甘油(过滤除菌) 100ml 室温干燥/24个月
10 × 磷酸钾缓冲液1M,PH6.0   500 ml 4℃/24个月

附言:YNB中含有大量易分解B族维生素,需要避光保存,液体的YNB在4℃可保存3个月,在-20℃最多保存12个月,粉末状YNB最长保存3年。1×YNB液体可过滤除菌,也可115℃-20min高压灭菌(虽然在高温高压下部分B族维生素会降解10-15%,但是仍有大量有活性的有效成分,不影响使用);10×YNB母液只能过滤除菌,不可高压灭菌。毕赤酵母不能合成生物素,必须额外添加。


产品组分与配方



产品组分
CAS号/来源 BMGY Broth配方g、mL/L
Peptone
BD Difco 20g

Yeast Extract

Oxoid 10g
YNB (含硫酸铵,无氨基酸) WD(YM1214) 13.4g
Biotin (生物素) CAS:58-85-5 0.4mg
Glycerol(甘油) CAS:56-81-5 10mL

PH值( 25°C) 6.0±0.1


使用方法


     本产品为预混BMGY Broth粉剂培养基。取BMGY Broth 43.4 g,加蒸馏水800ml溶解后,定容到878ml,115℃-20 min高压灭菌,灭菌后加入已经过滤除菌的50%甘油20ml,生物素母液(500 × B)2ml,10 × 磷酸钾缓冲液1M,PH6.0  100 ml,混匀后待温度降到30度左右使用。


不同蛋白适配的诱导前菌体扩增培养基


   蛋白类型  
   推荐培养基
   货号
   适配菌株
   普通分泌型蛋白(高产常规表达)
   BMGY
   CAT#:PIM1070L
   所有毕赤酵母菌株
   易降解、高敏感分泌蛋白
   BMG / BMGH
   CAT#:PIM1050L
   His⁺用BMG;his4⁻用BMGH
   所有胞内重组蛋白
   MGY / MGYH
   CAT#:PIM1030L
   His⁺用MGY;his4⁻用MGYH
   质谱/定量组学/同位素标记实验蛋白
   MGY / MGYH
   CAT#:PIM1030L
   His⁺用MGY;his4⁻用MGYH
   Mut⁺/Mutˢ表型鉴定配套培养
   MGY / MGYH
   CAT#:PIM1030L
   His⁺用MGY;his4⁻用MGYH
   pH敏感型蛋白(胞内/分泌)
   BMG / BMGH
   CAT#:PIM1050L
   His⁺用BMG;his4⁻用BMGH


注意事项


1. BMGY粉剂培养基需先补水,115℃-20 min高压灭菌后使用;若发现有严重吸潮现象,停止使用。

2. BMGY为生长专用培养基,仅用于菌体扩增阶段,无甲醇诱导功能,不可用于蛋白表达诱导。

3. 切换诱导培养基时,必须彻底去除残留甘油,甘油会抑制AOX1启动子,导致后续蛋白诱导表达失败。

4. 若配制少于0.5L,按每100ml加4.34g预混培养基的比例加入即可,剩余培养基可封口后放干燥处保存。

5. 生物素对紫外/强光敏感,需要避光保存,液体的生物素最多保存12个月,粉末状生物素最长保存3年。