MD/MDH with Agar 粉剂培养基 - 上海唯地生物技术有限公司

毕赤培养基与试剂

培养基系列

MD/MDH with Agar 粉剂培养基

产品说明

MD培养基（Minimal Dextrose Medium），这是一种在毕赤酵母蛋白表达试验中用于营养缺陷型筛选的基础葡萄糖培养基。MD 中的 "D" 指的是葡萄糖，MD中不含组氨酸，为组氨酸缺陷培养基，可用于组氨酸缺陷毕赤酵母（GS115、SMD1168等）转化含有组氨酸筛选标记的质粒后的菌落筛选、阳性克隆划线纯化等试验。GS115、SMD1168等毕赤菌株为组氨酸缺陷型（His⁻），无法在不含组氨酸的培养基上生长，当成功整合了含有 HIS4 基因的重组质粒后，酵母获得了合成组氨酸的能力（His⁺），可以在MD培养基上正常生长，形成肉眼可见的单菌落，重组失败的空白缺陷酵母细胞株完全不长，将涂菌后的平板在30℃恒温培养 3~5 天即可长出阳性菌落。

MDH 培养基全称：Minimal Dextrose Medium + 组氨酸，在MD培养基中加入组氨酸，主要用途如下：

1. 原始缺陷宿主菌（GS115、SMD1168）常规活化；

2. 组氨酸缺陷菌株阳性克隆摇菌扩增，诱导前预培养；

3. 重组了Zeocin 标记载体（pPICZ/A/B/C 系列等）的毕赤酵母的诱导前的预培养；

4. 验证毕赤酵母菌株的组氨酸缺陷表型。

产品内容

包装名称	货号	包装含量	包装数量	目录价	保存条件/时间
MD/MDH with Agar 粉剂培养基	PIM1020S-01	16.7g(每袋可配制0.5L MD 固体)	5袋	580	室温干燥/24个月
		500 × B (0.02% Biotin)	5ml		-20℃/12个月
		50%葡萄糖溶液（过滤除菌）	100ml		室温干燥/24个月
		100× H (0.4% Histidine)	25ml		4℃/24个月

附言：YNB中含有大量易分解B族维生素，需要避光保存，液体的YNB在4℃可保存3个月，在-20℃最多保存12个月，粉末状YNB最长保存3年。1×YNB液体可过滤除菌，也可115℃-20min高压灭菌（虽然在高温高压下部分B族维生素会降解10-15%，但是仍有大量有活性的有效成分，不影响使用）；10×YNB母液只能过滤除菌，不可高压灭菌。毕赤酵母不能合成生物素，必须额外添加。

产品组分与配方

产品组分	CAS号/来源	MD配方g/L	MDH配方g/L
YNB (含硫酸铵，无氨基酸)	WD（YM1214）	13.4g	13.4g
Glucose（葡萄糖）	CAS:50-99-7	20g	20g
Biotin （生物素）	CAS:58-85-5	0.4mg	0.4mg
Histidine（组氨酸）	CAS:9002-18-0	——	40mg
Agar（琼脂粉）	CAS:9002-18-0	20g	20g

PH值( 25°C) 5.8±0.1：本产品加入PH7.0的去离子水后PH接近5.8，可不调PH值直接使用。

使用方法

本产品为预混MD with Agar粉剂培养基。取MD with Agar粉剂培养基一袋（16.7 g），加蒸馏水400ml溶解后，定容到480ml，115℃-20min高压灭菌。灭菌后温度降到65度以下加入已经过滤除菌的50%葡萄糖溶液20ml，生物素母液（500 × B）1ml，混匀后倒平板即是MD平板。在每袋MD with Agar培养基中加入5ml 100× H即是MDH固体培养基/平板。

注意事项

1. MD with Agar粉剂培养基需先补水，115℃-20min高压灭菌后使用；若发现有严重吸潮现象，停止使用。

2. MD with Agar粉剂培养基加入PH7.0的去离子水后PH约5.8，可不调PH值直接使用，不影响酵母生长。

3. 若配制少于0.5L，按每100ml加3.34g预混培养基的比例加入即可，剩余培养基可封口后放干燥处保存。

4. 生物素对紫外/强光敏感，需要避光保存，液体的生物素最多保存12个月，粉末状生物素最长保存3年。