昆虫细胞蛋白表达/纯化
产品说明
High Five 源自粉纹夜蛾（Trichoplusia ni）的 BTI-Tn-5B1-4 细胞系。分泌型与胞内蛋白的表达量普遍高于 Sf9/Sf21，是分泌表达与质粒瞬时转染的首选宿主。配合 Nova SFM™ 广谱通用无血清培养基，最大可达密度 10×10⁶ cells/mL。病毒扩增环节仍推荐使用 Sf9；High Five 主要承担感染表达与瞬时表达。
产品规格
名称
货号
规格
目录价
High Five 昆虫细胞
Bic1050
1mL×1管
1600
产品内容
包装名称
包装数量
保存条件
保存时间
High Five 昆虫细胞
1管
–80 ℃ / 液氮
2 年 / 长期
注意：干冰运输。收到后请立即检查冻存管状态，并尽快转入 –80 ℃ 或液氮气相保存；–80 ℃ 保存不超过 2 年，长期保存请转入液氮。冻存管不可反复冻融。
细胞特性
细胞系
倍增时间
细胞形态
推荐培养基
High Five
18–24 小时
球形，略带颗粒感，大小不一；贴壁松散
Nova SFM™（IM1011S）
Nova 921 SFM™ 昆虫细胞无血清培养基是一款经过优化的即用型 (Ready-to-Use) 1× 液体培养基，专门为 Sf9/Sf21 细胞的高密度悬浮培养、贴壁培养、杆状病毒扩增及重组蛋白表达而设计。该培养基不含血清，可为 NovaBac™ 杆状病毒表达载体系统（货号：INK1001）提供稳定可靠的高产量表达环境。
本培养基已预先添加 L-谷氨酰胺及非离子表面活性剂 Pluronic® F-68，可直接用于细胞培养，无需另行补充。
▍重要提示：经 RT-PCR 确认，High Five 细胞携带内源性 α-nodavirus。在某些条件下可产生病毒颗粒，但不影响异源蛋白表达及其预期研究用途。
产品信息与培养条件
培养条件
要求
培养温度
26–28 ℃（昆虫血淋巴温度，非湿度控制）
CO₂
无需 CO₂ 交换；非湿化培养箱
培养基
Nova SFM™ 昆虫细胞无血清培养基（货号：IM1011S / IM1011L），完全配方，无需额外补充
摇床转速
振幅 19 / 25 mm：125 ± 5 rpm | 振幅 50 mm：95 ± 5 rpm
操作环境
在二级生物安全柜或超净工作台中进行，严格无菌操作
推荐操作步骤
一、 细胞复苏（悬浮培养）
1. 将培养基提前取出，平衡至室温。
2. 从液氮罐取出冻存管，置于 37 ℃ 水浴轻轻晃动，约 1–2 分钟至仅剩小冰晶
3. 用 75 % 乙醇消毒管外壁，移入超净工作台，将细胞悬液转入 15 mL 无菌离心管。
4. 缓慢逐滴加入预温的 5 mL 新鲜培养基，边加边轻轻摇匀，避免渗透冲击。
5. 取样计数，按 2 × 10⁴–5 × 10⁴ 活细胞/cm² 接种至合适规格培养瓶（T-25 加 5 mL、T-75 加 10 mL、T-150 加 30 mL）。
6. 置于 26–28 ℃、非湿化、无 CO₂ 培养箱静置培养；长至约 90 % 汇合时按脱落法（Sloughing）首次传代。
二、 细胞传代（悬浮培养）
1. 贴壁：约 90 % 汇合时传代，接种密度 2 × 10⁴–5 × 10⁴ 活细胞/cm²；悬浮：密度达 2 × 10⁶–5 × 10⁶ cells/mL 时传代，接种 3 × 10⁵–5 × 10⁵ 活细胞/mL。
2. 脱落法：吸除大部分旧培养基仅保留约 5 mL，倾斜培养瓶，用吸管吸取培养基从瓶底角向对角斜向轻柔冲洗单层，可重复 1–2 次。
3. 工作体积：125 mL 摇瓶 30–50 mL；250 mL 摇瓶 75–100 mL；> 500 mL 取瓶体积的 1/4–1/3。
4. 每次传代前后计数，活力应 ≥ 90 %；建议每 3 个月复苏一次新细胞，低代次（< 10 代）冻存工作储备。
三、 细胞冻存
1. 在对数中期采集活力 > 90 % 的细胞，建议 15 代次以下冻存。
2. 100–200 × g 离心 5 分钟收集细胞沉淀，轻弹管底松动沉淀。
3. 缓慢加入 2–8 ℃ 预冷的 NovaCryo™ 无血清昆虫细胞冻存液（货号：INR1001），轻柔吹打重悬至目标密度。
4. 按 1 mL/管分装，直接置于 –80 ℃ 过夜，次日转入液氮长期保存。
5. 冻存次日随机取一管复苏预检；预检通过前不可丢弃原生长培养。
产品规格
名称
货号
规格
目录价
High Five 昆虫细胞
Bic1050
1mL×1管
1600
产品内容
包装名称
包装数量
保存条件
保存时间
High Five 昆虫细胞
1管
–80 ℃ / 液氮
2 年 / 长期
注意：干冰运输。收到后请立即检查冻存管状态，并尽快转入 –80 ℃ 或液氮气相保存；–80 ℃ 保存不超过 2 年，长期保存请转入液氮。冻存管不可反复冻融。
细胞特性
细胞系
倍增时间
细胞形态
推荐培养基
High Five
18–24 小时
球形，略带颗粒感，大小不一；贴壁松散
Nova SFM™（IM1011S）
Nova 921 SFM™ 昆虫细胞无血清培养基是一款经过优化的即用型 (Ready-to-Use) 1× 液体培养基，专门为 Sf9/Sf21 细胞的高密度悬浮培养、贴壁培养、杆状病毒扩增及重组蛋白表达而设计。该培养基不含血清，可为 NovaBac™ 杆状病毒表达载体系统（货号：INK1001）提供稳定可靠的高产量表达环境。
本培养基已预先添加 L-谷氨酰胺及非离子表面活性剂 Pluronic® F-68，可直接用于细胞培养，无需另行补充。
▍重要提示：经 RT-PCR 确认，High Five 细胞携带内源性 α-nodavirus。在某些条件下可产生病毒颗粒，但不影响异源蛋白表达及其预期研究用途。
产品信息与培养条件
培养条件
要求
培养温度
26–28 ℃（昆虫血淋巴温度，非湿度控制）
CO₂
无需 CO₂ 交换；非湿化培养箱
培养基
Nova SFM™ 昆虫细胞无血清培养基（货号：IM1011S / IM1011L），完全配方，无需额外补充
摇床转速
振幅 19 / 25 mm：125 ± 5 rpm | 振幅 50 mm：95 ± 5 rpm
操作环境
在二级生物安全柜或超净工作台中进行，严格无菌操作
推荐操作步骤
一、 细胞复苏（悬浮培养）
1. 将培养基提前取出，平衡至室温。
2. 从液氮罐取出冻存管，置于 37 ℃ 水浴轻轻晃动，约 1–2 分钟至仅剩小冰晶
3. 用 75 % 乙醇消毒管外壁，移入超净工作台，将细胞悬液转入 15 mL 无菌离心管。
4. 缓慢逐滴加入预温的 5 mL 新鲜培养基，边加边轻轻摇匀，避免渗透冲击。
5. 取样计数，按 2 × 10⁴–5 × 10⁴ 活细胞/cm² 接种至合适规格培养瓶（T-25 加 5 mL、T-75 加 10 mL、T-150 加 30 mL）。
6. 置于 26–28 ℃、非湿化、无 CO₂ 培养箱静置培养；长至约 90 % 汇合时按脱落法（Sloughing）首次传代。
二、 细胞传代（悬浮培养）
1. 贴壁：约 90 % 汇合时传代，接种密度 2 × 10⁴–5 × 10⁴ 活细胞/cm²；悬浮：密度达 2 × 10⁶–5 × 10⁶ cells/mL 时传代，接种 3 × 10⁵–5 × 10⁵ 活细胞/mL。
2. 脱落法：吸除大部分旧培养基仅保留约 5 mL，倾斜培养瓶，用吸管吸取培养基从瓶底角向对角斜向轻柔冲洗单层，可重复 1–2 次。
3. 工作体积：125 mL 摇瓶 30–50 mL；250 mL 摇瓶 75–100 mL；> 500 mL 取瓶体积的 1/4–1/3。
4. 每次传代前后计数，活力应 ≥ 90 %；建议每 3 个月复苏一次新细胞，低代次（< 10 代）冻存工作储备。
三、 细胞冻存
1. 在对数中期采集活力 > 90 % 的细胞，建议 15 代次以下冻存。
2. 100–200 × g 离心 5 分钟收集细胞沉淀，轻弹管底松动沉淀。
3. 缓慢加入 2–8 ℃ 预冷的 NovaCryo™ 无血清昆虫细胞冻存液（货号：INR1001），轻柔吹打重悬至目标密度。
4. 按 1 mL/管分装，直接置于 –80 ℃ 过夜，次日转入液氮长期保存。
5. 冻存次日随机取一管复苏预检；预检通过前不可丢弃原生长培养。
引用唯地生物产品SCI文献统计信息
