分类

昆虫细胞蛋白表达/纯化

● Sf9冻存昆虫细胞
Sf9 Insect Cell

产品说明

     Sf9 源自 IPLB-SF-21 细胞系,取自秋粘虫(Spodoptera frugiperda)蛹期卵巢组织;Sf9 是 IPLB-SF-21-AE 的克隆株,细胞大小均一、易于操作,形成的单层和蚀斑更规整,是昆虫细胞表达蛋白的常用细胞株。

     贴壁与悬浮培养均可,27 ℃ 培养、无需 CO₂ 气瓶。配合 Nova 921 SFM™ 无血清培养基,最大可达密度 30×10⁶ cells/mL;使用 Nova SFM™ 时最大可达密度 17×10⁶ cells/mL。


产品规格


名称
货号
规格
目录价
Sf9昆虫细胞
Bic1009
1mL×1管
1600


产品内容


包装名称
包装数量
保存条件
保存时间
Sf9 昆虫细胞
1管
–80 ℃ / 液氮
2 年 / 长期

注意:干冰运输。收到后请立即检查冻存管状态,并尽快转入 –80 ℃ 或液氮气相保存;–80 ℃ 保存不超过 2 年,长期保存请转入液氮。冻存管不可反复冻融。


产品简介


细胞系
倍增时间
细胞形态
推荐培养基
Sf9
24–30 小时
球形,略带颗粒感,大小规则;贴壁牢固
Nova 921 SFM(IM1001S)

    本说明书适用于 Sf9、Sf21 昆虫细胞系的常规培养、复苏、传代及冻存操作,可用于 NovaBac 杆状病毒表达系统(货号:INK1001)。Sf9 与 Sf21 源自 IPLB-SF-21 细胞系,取自秋粘虫(Spodoptera frugiperda)蛹期卵巢组织;Sf9 是 IPLBSF21-AE(Sf21)的克隆株。

▍细胞系选择建议
● Bacmid 转染、病毒纯化及扩增:推荐 Sf9 / Sf21。Sf9 细胞大小均一、易于操作,形成的单层和蚀斑更规整;Sf21 对部分毒性蛋白与分泌型蛋白耐受性更好。

● 分泌型重组蛋白表达及 NovaRapid 快速瞬时表达系统(货号:INK2001):推荐 High Five(货号:Bic1050)。


产品信息与培养条件


   培养条件
   要求
   培养温度
   26–28 ℃(低于 26 ℃ 生长变慢;持续高于 30 ℃ 活力下降且可能无法恢复)
   CO₂
   无需 CO₂;非湿化培养箱
   培养基
   Nova 921 SFM™ 昆虫细胞无血清培养基(货号:IM1001S / IM1001L),完全配方,无需额外补充
   摇床转速
   振幅 19 / 25 mm:125 ± 5 rpm | 振幅 50 mm:95 ± 5 rpm
   操作环境
   在二级生物安全柜或超净工作台中进行,严格无菌操作


推荐操作步骤


一、 细胞复苏(悬浮培养)

1. 培养基预温至室温;取冻存管于 37 ℃ 水浴快速解冻至仅剩小冰晶(约 1–2 分钟)。

2. 用 75 % 乙醇擦拭管外壁,移入超净工作台,将细胞悬液转入 50 mL 无菌离心管。

3. 缓慢逐滴加入 5 mL 预温新鲜培养基,同时轻轻旋摇混匀,避免渗透冲击。

4. 取样计数,转入 125 mL 摇瓶,补加培养基至终体积 25–30 mL,终密度 3 × 10⁵–5 × 10⁵ 活细胞/mL。

5. 置于 26–28 ℃ 非湿化培养箱,摇床 90–100 rpm(振幅 50 mm);4–5 天密度通常可达 > 2 × 10⁶ cells/mL。

6. 当密度达 2 × 10⁶–4 × 10⁶ cells/mL 时进行首次传代。


二、 细胞传代(悬浮培养)

1. 在对数生长中期传代;每次传代前后计数,活力应 ≥ 90 %(悬浮通常 ≥ 95 %)。

2. 密度达 2 × 10⁶–5 × 10⁶ cells/mL 时传代,起始密度 3 × 10⁵–5 × 10⁵ 活细胞/mL。

3. 摇瓶:26–28 ℃,90–100 rpm;转瓶:80–90 rpm,叶轮需浸没 ≥ 1 cm。

4. 工作体积:125 mL 摇瓶 30–50 mL;250 mL 摇瓶 75–100 mL;> 500 mL 取瓶体积的 1/4–1/3。

5. 建议每 3 个月复苏一次新细胞;尽量在低代次(< 10 代)冻存工作储备。


三、 细胞冻存

1. 在对数中期采集活力 > 90 % 的细胞,一般在 15 代以下冻存。

2. 100–200 × g 离心 5 分钟收集细胞沉淀,轻弹管底松动沉淀。

3. 缓慢加入 2–8 ℃ 放置的 NovaCryo™ 无血清昆虫细胞冻存液(货号:INR1001),轻柔吹打重悬至 1.0 × 10⁷–2.0 × 10⁷ cells/mL。

4. 按 1 mL/管分装,直接置于 –80 ℃ 过夜,次日转入液氮长期保存。

5. 冻存次日随机取一管复苏预检(无菌性、形态),预检通过前不可丢弃原生长培养。


细胞计数:取 15–50 μL 细胞悬液加等体积 0.4 % 台盼蓝,3–5 分钟内完成镜检,否则活细胞也会着色导致活率被低估。


产品规格


名称
货号
规格
目录价
Sf9昆虫细胞
Bic1009
1mL×1管
1600


产品内容


包装名称
包装数量
保存条件
保存时间
Sf9 昆虫细胞
1管
–80 ℃ / 液氮
2 年 / 长期

注意:干冰运输。收到后请立即检查冻存管状态,并尽快转入 –80 ℃ 或液氮气相保存;–80 ℃ 保存不超过 2 年,长期保存请转入液氮。冻存管不可反复冻融。


产品简介


细胞系
倍增时间
细胞形态
推荐培养基
Sf9
24–30 小时
球形,略带颗粒感,大小规则;贴壁牢固
Nova 921 SFM(IM1001S)

    本说明书适用于 Sf9、Sf21 昆虫细胞系的常规培养、复苏、传代及冻存操作,可用于 NovaBac 杆状病毒表达系统(货号:INK1001)。Sf9 与 Sf21 源自 IPLB-SF-21 细胞系,取自秋粘虫(Spodoptera frugiperda)蛹期卵巢组织;Sf9 是 IPLBSF21-AE(Sf21)的克隆株。

▍细胞系选择建议
● Bacmid 转染、病毒纯化及扩增:推荐 Sf9 / Sf21。Sf9 细胞大小均一、易于操作,形成的单层和蚀斑更规整;Sf21 对部分毒性蛋白与分泌型蛋白耐受性更好。

● 分泌型重组蛋白表达及 NovaRapid 快速瞬时表达系统(货号:INK2001):推荐 High Five(货号:Bic1050)。


产品信息与培养条件


   培养条件
   要求
   培养温度
   26–28 ℃(低于 26 ℃ 生长变慢;持续高于 30 ℃ 活力下降且可能无法恢复)
   CO₂
   无需 CO₂;非湿化培养箱
   培养基
   Nova 921 SFM™ 昆虫细胞无血清培养基(货号:IM1001S / IM1001L),完全配方,无需额外补充
   摇床转速
   振幅 19 / 25 mm:125 ± 5 rpm | 振幅 50 mm:95 ± 5 rpm
   操作环境
   在二级生物安全柜或超净工作台中进行,严格无菌操作


推荐操作步骤


一、 细胞复苏(悬浮培养)

1. 培养基预温至室温;取冻存管于 37 ℃ 水浴快速解冻至仅剩小冰晶(约 1–2 分钟)。

2. 用 75 % 乙醇擦拭管外壁,移入超净工作台,将细胞悬液转入 50 mL 无菌离心管。

3. 缓慢逐滴加入 5 mL 预温新鲜培养基,同时轻轻旋摇混匀,避免渗透冲击。

4. 取样计数,转入 125 mL 摇瓶,补加培养基至终体积 25–30 mL,终密度 3 × 10⁵–5 × 10⁵ 活细胞/mL。

5. 置于 26–28 ℃ 非湿化培养箱,摇床 90–100 rpm(振幅 50 mm);4–5 天密度通常可达 > 2 × 10⁶ cells/mL。

6. 当密度达 2 × 10⁶–4 × 10⁶ cells/mL 时进行首次传代。


二、 细胞传代(悬浮培养)

1. 在对数生长中期传代;每次传代前后计数,活力应 ≥ 90 %(悬浮通常 ≥ 95 %)。

2. 密度达 2 × 10⁶–5 × 10⁶ cells/mL 时传代,起始密度 3 × 10⁵–5 × 10⁵ 活细胞/mL。

3. 摇瓶:26–28 ℃,90–100 rpm;转瓶:80–90 rpm,叶轮需浸没 ≥ 1 cm。

4. 工作体积:125 mL 摇瓶 30–50 mL;250 mL 摇瓶 75–100 mL;> 500 mL 取瓶体积的 1/4–1/3。

5. 建议每 3 个月复苏一次新细胞;尽量在低代次(< 10 代)冻存工作储备。


三、 细胞冻存

1. 在对数中期采集活力 > 90 % 的细胞,一般在 15 代以下冻存。

2. 100–200 × g 离心 5 分钟收集细胞沉淀,轻弹管底松动沉淀。

3. 缓慢加入 2–8 ℃ 放置的 NovaCryo™ 无血清昆虫细胞冻存液(货号:INR1001),轻柔吹打重悬至 1.0 × 10⁷–2.0 × 10⁷ cells/mL。

4. 按 1 mL/管分装,直接置于 –80 ℃ 过夜,次日转入液氮长期保存。

5. 冻存次日随机取一管复苏预检(无菌性、形态),预检通过前不可丢弃原生长培养。


细胞计数:取 15–50 μL 细胞悬液加等体积 0.4 % 台盼蓝,3–5 分钟内完成镜检,否则活细胞也会着色导致活率被低估。



引用唯地生物产品SCI文献统计信息