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大肠杆菌转化

单菌落长不起来!

文字:[大][中][小] 2015-9-28    浏览次数:1148    

1µg/µl pUC19为标准质粒转化感受态细胞,涂布Amp+板后,总是大片大片的,单菌落长不起来!已检测过抗生素没问题。整个过程在超净工作台操作,并且十分注意无菌操作,以及做实验所需的各种器皿,离心管等的清洁,专用!不知是什么原因?


:在排除抗生素是否失效的原因后,请检查转化步骤!在完整质粒重转操作时,请勿将菌体全部涂布于平板上。因为大量菌体的存在抑制正常转化子的生长。改正的方法有两种:一是省去37℃复苏培养的步骤,这样不但节省了时间,而且也不出现云雾了;二是37℃复苏后只吸取50-100µl菌液涂布即可。您不妨试试看是不是这个原因,希望对您有帮助!



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