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克隆感受态_热激

TG1

文字:[大][中][小] 2015-8-26    浏览次数:4043    

 TG1 Chemically Competent Cell 产品说明书 



产品规格(CAT#: DL1055)

TG1:                                                         100μl/支

pUC19 (control vector,10pg/μl):                   10μl

保存条件(保质期):                            -80℃(6个月) 



基因型

[F´traD36 proAB lacIqM15] supE thi-1Δ(lac-proAB)Δ(mcrB-hsdSM)5(rKmK)


产品说明

TG1来源于E. coli K-12菌株,是目前生长速度最快的克隆用大肠杆菌菌株,在平板上37℃,7 h可见克隆。主要的噬菌体展示用菌株,同时也可用于普通质粒的构建,lacIqZΔM15的存在使其可以用于蓝白斑筛选等实验;但不含核酸酶endA1突变,体内核酸酶含量较高,提取质粒时推荐使用质粒提取试剂盒中去蛋白液以去除菌体内大量的核酸酶。TG1感受态细胞经特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率>109cfu/μg DNA。 


操作方法

1. TG1感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手拨打EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。

2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。

3. 向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基 (2YTLB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。

4. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YTLB培养基上。

5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。


注意事项

1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。

2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。

3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。





说明书下载

TG1 Chemically Competent Cell 产品说明书



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