1802

Carrier DNA

2018-6-12

                                               Carrier DNA说明书





产品规格

 

产品名称

货号

规格

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Carrier DNA

YC5002S

10μg/μl, 100 µl

-20, 12个月

Carrier DNA

YC5002M

10μg/μl, 1 ml

-20, 12个月

 

产品说明


      Carrier DNA (鲑鱼精DNA) 为短的线形单链DNA,可包裹质粒DNA,在酵母细胞摄取外源质粒DNA过程中发挥作用,促进质粒进入酵母细胞,另外还可保护质粒免于被DNA酶降解。在每次使用前务必进行两次热变性,保证Carrier DNA在转化实验体系中以单链形式存在。Carrier DNA是唯地生物生产的酵母感受态细胞转化所必需的配套试剂,每个转化反应需要10 µl Carrier DNA

 

操作方法

 

1. Carrier DNA 在每次使用前要通过加热处理使其变性为单链状态,步骤如下:Carrier DNA 95℃水浴或金属浴3 min,快速插入冰中,静置3 min,再次放95℃水浴或金属浴3 min,快速插入冰中,静置3 min以上。

2. 100 µl冰上融化的酵母感受态细胞,依次加入预冷的目的质粒2-5 µgCarrier DNA 10 µlPEG/LiAc 500 µl并吸打几次混匀,30℃水浴30 min (15 min时翻转6-8次混匀)

3. 将管放42℃水浴15 min (7.5 min时翻转6-8次混匀)

4. 5000 rpm离心 40 s弃上清,ddH2O 400 µl 重悬,离心 30s弃上清。

5. ddH2O 50 µl重悬,涂板,29℃培养48-96 h

 

注意事项


 1. 在每次使用前务必进行两次热变性,保证Carrier DNA在转化实验体系中以单链形式存在。

 2. Carrier DNA 可在4℃短时间保存,如需长时间保存请放-20


  

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PEG/LiAc

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